动物实验云课堂：社交新奇性偏好测试（Social novelty preference test）方法总结

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　　实验介绍

　　社交偏好是群居动物表现出的一种特征，即与同种动物互动而不是与另一种同种动物互动的决定，这对于导航它们的社交空间至关重要。成年啮齿类动物更喜欢与它们的亲属互动，来自特定品系的个体和异性成员。除了先天因素（例如亲属、血统和性别）之外，社交偏好还受到社会记忆、社会等级制度、和情感状态的影响。自闭症谱系障碍（ASD）是一种神经发育障碍，其特征是社交沟通缺陷和其他行为异常。社交新奇性偏好测试（Social novelty preference test）的实验设计可以评估社会行为的两个关键但可区分的方面，例如社会归属/动机，以及社会记忆和新颖性。在这种情况下，“社交性”被定义为与另一只小鼠共度时光的倾向。“对社交新奇事物的偏好”被定义为倾向于花时间与以前未遇到过的鼠而不是与熟悉的鼠在一起。可用于评估评估动物的社交行为能力，自发活动、学习记忆能力、抑郁水平等。用于评价实验动物对新同类的记忆能力，通过观察并记录实验鼠靠近熟悉小鼠与陌生小鼠的时间和次数等参数来评价其社交新奇偏爱行为。

　　测试步骤

　　该测试与开放场地和社交测试在同一场地进行。测试小鼠可自由探索试验场10分钟。然后，测试小鼠探索对角的两个金属丝杯5分钟（学习试验）。每个杯子里都有一只新的小鼠。将刺激小鼠从杯子中取出，并将测试小鼠放入痛家笼大小相同的空笼子中30分钟。然后，将其中一只现在熟悉的小鼠放回其杯子下，同时将一只新小鼠放入另一个杯子下（回忆试验）。测试小鼠可以自由地再次探索每个杯子5分钟。所有3只刺激小鼠都是同窝出生的小鼠，饲养在同一环境中。测试前一天晚上，将测试小鼠单独放入干净的笼子中。第二天，引入一只新小鼠或同窝小鼠进行2分钟内的1次单次试验。在录制过程中同时标注了2分钟内互动的总时间。当嗅探身体的任何部位或发生追逐时，通过使用软件来检测社交互动。

　　在有线杯子内放置社交刺激可以防止这些小鼠在试验场中自由移动，并限制它们与受试者的直接身体接触。这反过来又减弱了攻击性和性行为的表达，同时仍然允许受试者探索和检测感官线索（即嗅觉、视觉、声音和触觉）。在这些条件下，受试小鼠只能控制主动寻找和调查社交刺激。与经典的三箱社交测试相比，该测试使用的杯子设计更加自由，同时仍然让测试小鼠能够自由地探索新奇或熟悉的小鼠，直接测试不同交互测试。通过自动跟踪测试小鼠（VisuTrack，上海欣软）可测试小鼠在学习和回忆过程中在每个杯子周围区域花费的时间，从而量化了与每个刺激小鼠互动的时间在学习和回忆过程中在每个杯子周围的直接区域，从而得出与每个刺激小鼠社交作用。

　　测试指标

　　嗅身体的任何部位、梳理毛发和密切关注都算作社交互动。

　　计算社交新颖性偏好的区分指数，如下所示：DI =（与新小鼠互动时间–与熟悉小鼠互动时间）/总互动时间。DI 表示与熟悉的小鼠相比，花在与新小鼠社交时间的百分比。与熟悉的动物相比，测试小鼠通常表现出的对新小鼠的偏好被用作社交指数。

　　还可计算每次试验期间与刺激小鼠互动所花费的总时间，以验证社交能力未受影响。

试验流程及记录数据

　　注意事项

　　陌生鼠（不熟悉）、笼中伙伴（熟悉）和受试者小鼠应该是相同性别，并且可以是相同年龄；

　　在转基因小鼠的研究中，熟悉的和不熟悉的小鼠应该具有相同的基因型，除非使用不同的基因型是实验设计的一部分；

　　受试者小鼠不应被用作熟悉的社交目标。相反，社会目标不应用作受试者小鼠；

　　及时清洗笼子从而防止测试小鼠使用任何笼子特有的气味线索。

　　参考文献

　　[1] De León Reyes NS , Sierra Díaz P , Nogueira R , et al. Corticotropin-releasing hormone signaling from prefrontal cortex to lateral septum suppresses interaction with familiar mice [J]. Cell, 2023, 186(19): 4152-4171.e4131.

　　[2] Watanabe S. The dominant/subordinate relationship between mice modifies the approach behavior toward a cage mate experiencing pain [J]. Behavioural processes, 2014, 103(1-4.

　　[3] Nadler JJ , Moy SS , Dold G , et al. Automated apparatus for quantitation of social approach behaviors in mice [J]. Genes, brain, and behavior, 2004, 3(5): 303-314.

　　[4] Oliva A , Fernández-Ruiz A , Leroy F , et al. Hippocampal CA2 sharp-wave ripples reactivate and promote social memory [J]. Nature, 2020, 587(7833): 264-269.

　　[5] Gheusi G , Bluthé RM , Goodall G , et al. Social and individual recognition in rodents: Methodological aspects and neurobiological bases [J]. Behavioural processes, 1994, 33(1-2): 59-87.

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