微生物菌种保藏的8种方法，你知道几种？

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2024-11-18 05:26点击次数：2773

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　　菌种保藏的目的是为了保存优良的微生物菌种，使其在适宜的环境条件下保持活力，避免突变和污染。以下是几种常用的菌种保藏方法：

　　1️⃣定期移植保藏法

　　将菌种接种在斜面或液体培养基上，待其生长至健壮状态后，放入4℃冰箱保藏。每隔一定时间需重新移植培养一次，如芽孢杆菌每3~6个月移种一次，其他细菌每月移种一次。

　　2️⃣液体石蜡保藏法

　　在生长良好的斜面表面覆盖一层无菌的液体石蜡，液面高出培养基1cm，然后将其置试管架上以直立状态低温保藏。此方法是定期保藏法的补充。

　　3️⃣沙管保藏法、土壤保藏法

　　这两种方法适用于特定菌种的保藏，具体操作见图2。

　　4️⃣麸皮保藏法

　　将麸皮或其他谷物与培养基成分按一定比例拌匀，高温灭菌后接入菌种孢子液，适宜温度下培养至长出菌丝，再干燥后低温保藏。常用于放线菌和霉菌的保藏。

　　5️⃣蒸馏水保藏法

　　每个试管中装5mL灭菌的无菌水，用接种针从斜面或平板上挑取一环菌种细胞，接入蒸馏水中并使之悬浮，试管用无菌的橡皮塞塞紧，放置10℃低温保藏。

　　6️⃣冷冻干燥保藏法

　　将菌液在冻结状态下升华其中水分，最后获得干燥的菌种样品。此方法是目前被广泛推崇的方法。

　　7️⃣液态超低温保藏法

　　将菌种悬浮封存于圆底安瓿管或塑料的液氮保存管内，放到-196℃~-150℃的液氮罐或液氮水箱内保藏。此法已被公认为当前最有效的菌种长期保存技术之一。

　　8️⃣甘油保藏法

　　菌种悬浮在10%（体积分数）甘油蒸馏水中，置低温（-80~70℃）保藏。实际中，常将待保藏菌培养至对数期的培养液直接加到已灭过菌的甘油中，并使甘油的终浓度在10%~30%左右，再分装于小离心管中，置低温保藏。基因工程常用此法保藏。

　　选择合适的保藏方法可以确保微生物菌种的长期活力和稳定性。

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